拉曼光譜儀檢測(cè)分析常見FAQ

一、測(cè)試了一些樣品，得到的是Ramanshift，但是文獻(xiàn)是wavenumber，不知道它們之間的轉(zhuǎn)換公式是怎么樣的？激光波長(zhǎng)632.8nm。

waveshift 拉曼位移；wavenumber 波數(shù)，波長(zhǎng)的倒數(shù)，用cm－1表示。
在拉曼譜圖中，橫坐標(biāo)表示的是拉曼位移，單位為波數(shù)。比如說硅的一階峰其拉曼位移在520 cm－1處。
簡(jiǎn)單說明一下拉曼位移的計(jì)算方法：若入射光的波長(zhǎng)為488nm，那么其對(duì)應(yīng)的波數(shù)為20492 cm－1；散射光的波長(zhǎng)假如為 490nm，對(duì)應(yīng)的波數(shù)為 20408 cm－1，拉曼位移：Δν＝20492－20408＝84 cm－1，即在拉曼譜圖中，在84 cm－1處有一個(gè)拉曼特征峰。
拉曼位移的計(jì)算公式：Δν＝入射光的波數(shù)－散射光的波數(shù)

二、如何用拉曼光譜儀測(cè)透明的有機(jī)物液體，測(cè)試時(shí)放到了玻璃片上測(cè)出來的結(jié)果是玻璃的光譜。
1. 可能是聚焦位置不對(duì)，聚在玻璃上了。
2. 用凹面載玻片，液體量會(huì)比較多，然后用顯微鏡聚焦好就可以了，如果液體有揮發(fā)性，液體上用蓋玻片，然后焦點(diǎn)聚焦到蓋玻片以下。
3. 建議：
（1）有機(jī)液體里面的分析物質(zhì)濃度多大? Raman測(cè)定的是散射光，所以在溶液中的強(qiáng)度相對(duì)比較底，故分析物濃度要大些。
（2）你用的是共聚焦Raman嗎？聚焦點(diǎn)要在毛細(xì)管的溶液里面才好。可以在溶液中放點(diǎn)“雜物”方便聚焦。
（3）玻璃是無定形態(tài)物質(zhì)，應(yīng)該Raman信號(hào)比較弱才對(duì)。

三、做生物樣品的拉曼光譜，在獲得的圖里面有很強(qiáng)的熒光，有的說，如果拉曼得不到就用其熒光譜。那么在拉曼譜里面得到的熒光背景，是真正的熒光特征譜嗎？這和熒光光譜儀里面的熒光圖有什么區(qū)別？ 
1. 原則上說，拉曼譜中的熒光和熒光譜中的熒光是一樣的，只要激發(fā)波長(zhǎng)和功率密度相同。注意橫坐標(biāo)要從波數(shù)變換為納米，即用10000000nm（1cm）除以波數(shù)就行了。但有一點(diǎn)要注意，不同波長(zhǎng)的激發(fā)光照射樣品，得到的拉曼相近，但熒光可以有很大不同，甚至相同波長(zhǎng)不同功率激發(fā)，熒光譜都大不一樣。
2. 生物樣品一般熒光峰比較寬，用熒光光測(cè)試之前一般先會(huì)做儀器本身曲線校正也就是儀器本身的響應(yīng)曲線，這樣測(cè)出的熒光峰才比較準(zhǔn)，特別是對(duì)于寬峰更要做這個(gè)較準(zhǔn)。
而Raman光譜一般采集的區(qū)域比較窄（指的是波長(zhǎng)區(qū)域），一般在窄的波長(zhǎng)范圍變化不大，因此一般不考慮儀器本身響應(yīng)曲線誤差，但是Raman光譜來測(cè)寬熒光峰，影響就比較大。 

四、什么是共焦顯微拉曼光譜儀?
1. 共焦拉曼指的是空間濾波的能力和控制被分析樣品的體積的能力。通常主要是利用顯微鏡系統(tǒng)來實(shí)現(xiàn)的。 
僅僅是增加一個(gè)顯微鏡到拉曼光譜儀上不會(huì)起到控制被測(cè)樣品體積的作用的—為達(dá)到這個(gè)目的需要一個(gè)空間濾波器。
2.(1)、顯微是利用了顯微鏡，可以觀測(cè)并測(cè)量微量樣品，zui小1微米左右
(2)、共焦是樣品在顯微鏡的焦平面上，而樣品的光譜信息被聚焦到CCD上，都是焦點(diǎn)，所以叫共聚焦 
3. 拉曼儀器的共焦有2種呢，一種是針孔共焦，一種是贗共焦.我覺得好像不應(yīng)該稱為贗共焦，共聚焦有真正的定義說一定要針孔才是共聚焦嗎？好像沒有，頂多稱為傳統(tǒng)共聚焦或者針孔共聚焦、簡(jiǎn)單共聚焦之類的。

顯微拉曼光譜技術(shù)是將拉曼光譜分析技術(shù)與顯微分析技術(shù)結(jié)合起來的一種應(yīng)用技術(shù)。與其他傳統(tǒng)技術(shù)相比，更易于直接獲得大量有價(jià)值信息，共聚焦顯微拉曼光譜不僅具有常規(guī)拉曼光譜的特點(diǎn)，還有自己的*優(yōu)勢(shì)。輔以高倍光學(xué)顯微鏡，具有微觀、原位、多相態(tài)、穩(wěn)定性好、空間分辨率高等特點(diǎn)，可實(shí)現(xiàn)逐點(diǎn)掃描，獲得高分辨率的三維圖像，近幾年共聚焦顯微拉曼光譜在腫瘤檢測(cè)、文物考古、*法學(xué)等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用
五、測(cè)固體粉末的拉曼圖譜時(shí)，對(duì)于熒光很強(qiáng)的物質(zhì)，應(yīng)該如何處理？特別是當(dāng)熒光將拉曼峰湮滅時(shí)，應(yīng)該怎么辦？增加照射時(shí)間的方法，連續(xù)照射了4小時(shí)，結(jié)果還是有很強(qiáng)的熒光。只有一臺(tái)532nm的激光器，所以更換激光波長(zhǎng)的方法不能用。還有別的方法嗎？
1. 使用SERS技術(shù)或者使用很少量的樣品進(jìn)行測(cè)量，或者稀釋你的樣品到一些別的基體里面去，比如說KBr。
2. 波長(zhǎng)不可調(diào)的話，激光強(qiáng)度應(yīng)該是可調(diào)的，你把激光強(qiáng)度調(diào)低點(diǎn)試試。這個(gè)在光源和軟件上都有調(diào)的。全調(diào)到比較低的，然后再用長(zhǎng)時(shí)間試試。
3. 可以嘗試找一種溶劑溶解粉末，看能不能猝滅熒光背景。采用反斯托克斯，濾光片用Nortch濾光片。
六、用激光拉曼儀能測(cè)量薄膜的厚度、折射率及應(yīng)力嗎？它能對(duì)薄膜進(jìn)行那些方面的測(cè)量呢？
1. 應(yīng)該不能測(cè)薄膜的厚度、折射率及應(yīng)力
2. 現(xiàn)在的共焦顯微拉曼可以做膜及不同層膜的，用橢偏儀更好 
3. 拉曼光譜可以測(cè)量應(yīng)力，厚度不行
4. 應(yīng)力可以測(cè)，應(yīng)力有差別的時(shí)候拉曼會(huì)有微小頻移，其他兩種沒聽說過拉曼能測(cè) 
七、拉曼做金屬氧化物含量的下限是多少? 有一種氧化物的混合物，其中MoO3含量只有5%，XRD檢測(cè)不到，拉曼可以嗎？
應(yīng)該和待測(cè)樣品的拉曼活性有關(guān)，并不能說一定能測(cè)到多少檢測(cè)線，有些氧化物可能純的樣品也測(cè)不出光譜，信號(hào)強(qiáng)的則可能會(huì)低一些。

八、在生物醫(yī)學(xué)方面的實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)溫度不同時(shí)，拉曼好像也不一樣。請(qǐng)解釋一下這個(gè)現(xiàn)象
溫度升高，拉曼線會(huì)頻移，線寬會(huì)變寬，只要物質(zhì)狀態(tài)不變，特征峰不會(huì)有太大變化，除非高溫造成化學(xué)反應(yīng)或者其他變化 。

九、文獻(xiàn)上說，拉曼的峰強(qiáng)與物質(zhì)的濃度是成正比關(guān)系，那么比如配置1mol/L的某溶液，和0.5mol/L的溶液，其峰強(qiáng)度是正好一半的關(guān)系嗎？應(yīng)用拉曼，是否能采用峰積分，或者用近紅外那樣的多元統(tǒng)計(jì)的辦法來定量嗎？準(zhǔn)確度怎么樣？
存在激發(fā)效率的問題，拉曼一直以來被認(rèn)為只能做半定量的研究，就是因?yàn)椴皇蔷€性的。

十、拉曼峰1640對(duì)應(yīng)的無機(jī)物是什么東西呢？
1. 這個(gè)峰一般來說是C=O雙鍵的峰，可是如果是無機(jī)物，很有可能是某一個(gè)基團(tuán)的倍頻峰，看看820左右或者是某兩個(gè)峰的疊加。
2. 也有可能是在測(cè)量過程當(dāng)中由于激光引起的碳化物質(zhì)。還有一種可能就是C=C.
3. 拉曼在1610-1680波數(shù)區(qū)間有C=N雙鍵的強(qiáng)吸收

十一、1 紅外分析氣體需要多高的分辨率？2 拉曼光譜儀是否可分析純金屬？
1，分析氣體時(shí)理論上zui高只需0.5cm-1。實(shí)際應(yīng)用上絕大部分情況下4cm-1已足夠。對(duì)于氣體，還是希望分辨率高一些好，一般都用1cm－1一下，這樣對(duì)氣體的一些微小峰的變化檢測(cè)更好
2，基本上不可能。金屬不太可能作出來，因?yàn)橐话悴话l(fā)生分子極化率改變。

十二、測(cè)定過渡金屬絡(luò)合物水溶液中金屬與有機(jī)物中的某個(gè)原子是否成鍵可以用拉曼光譜分析嗎？
如果鍵能對(duì)應(yīng)的波數(shù)在100cm-1以上，估計(jì)是可以的，現(xiàn)在比較新的拉曼光譜儀就可以。

十三、金紅石和銳鈦礦對(duì)紫外Raman的響應(yīng)差別大不大？同樣條件下的金紅石和銳鈦礦的Raman峰會(huì)不會(huì)差很多？
用不同的激發(fā)光激發(fā)樣品，若激光對(duì)樣品沒有破壞作用，拉曼譜圖中譜峰的相對(duì)強(qiáng)度有時(shí)會(huì)發(fā)生一些變化，但不會(huì)*變了，否則就很難用拉曼光譜進(jìn)行定性分析了。
TiO2礦物的情況比較特殊，它們有三種晶型：銳鈦礦、板鈦石和金紅石，其中板鈦礦比較少見。銳鈦石的特征是142cm-1左右的強(qiáng)峰，金紅石中此峰消失或很弱。但我們經(jīng)常見到的不是這兩種情況，而多是介于金紅石或銳鈦石中間的TiO2相。有時(shí)一個(gè)顆粒中，若激光作用在不同的點(diǎn)上，也會(huì)打出差別較大的譜圖來。

峰差可能有兩個(gè)原因：一是換波長(zhǎng)后，激光與樣品的作用點(diǎn)移動(dòng)；二是激光的能量使樣品的晶型發(fā)生變化。

十四、什么是3CCD？
     ＣＣＤ，是英文Charge Coupled Device 即電荷耦合器件的縮寫，它是一種特殊半導(dǎo)體器件，上面有很多一樣的感光元件，每個(gè)感光元件叫一個(gè)像素。ＣＣＤ在攝像機(jī)里是一個(gè)極其重要的部件，它起到將光線轉(zhuǎn)換成電信號(hào)的作用，類似于人的眼睛，因此其性能的好壞將直接影響到攝像機(jī)的性能。
      衡量ＣＣＤ好壞的指標(biāo)很多，有像素?cái)?shù)量，ＣＣＤ尺寸，靈敏度，信噪比等，其中像素?cái)?shù)以及ＣＣＤ尺寸是重要的指標(biāo)。像素?cái)?shù)是指ＣＣＤ上感光元件的數(shù)量。攝像機(jī)拍攝的畫面可以理解為由很多個(gè)小的點(diǎn)組成，每個(gè)點(diǎn)就是一個(gè)像素。顯然，像素?cái)?shù)越多，畫面就會(huì)越清晰，如果ＣＣＤ沒有足夠的像素的話，拍攝出來的畫面的清晰度就會(huì)大受影響，因此，理論上ＣＣＤ的像素?cái)?shù)量應(yīng)該越多越好。但ＣＣＤ像素?cái)?shù)的增加會(huì)使制造成本以及成品率下降，而且在現(xiàn)行電視標(biāo)準(zhǔn)下，像素?cái)?shù)增加到某一數(shù)量后，再增加對(duì)拍攝畫面清晰度的提果變得不明顯，因此，一般一百萬左右的像素?cái)?shù)對(duì)一般的使用已經(jīng)足夠了。
      單ＣＣＤ攝像機(jī)是指攝像機(jī)里只有一片ＣＣＤ并用其進(jìn)行亮度信號(hào)以及彩色信號(hào)的光電轉(zhuǎn)換，其中色度信號(hào)是用ＣＣＤ上的一些特定的彩色遮罩裝置并結(jié)合后面的電路完成的。由于一片ＣＣＤ同時(shí)完成亮度信號(hào)和色度信號(hào)的轉(zhuǎn)換，因此難免兩全，使得拍攝出來的圖像在彩色還原上達(dá)不到**水平很的要求。為了解決這個(gè)問題，便出現(xiàn)了３ＣＣＤ攝像機(jī)。
      ３ＣＣＤ，顧名思義，就是一臺(tái)攝像機(jī)使用了３片ＣＣＤ。我們知道，光線如果通過一種特殊的棱鏡后，會(huì)被分為紅，綠，藍(lán)三種顏色，而這三種顏色就是我們電視使用的三基色，通過這三基色，就可以產(chǎn)生包括亮度信號(hào)在內(nèi)的所有電視信號(hào)。如果分別用一片ＣＣＤ接受每一種顏色并轉(zhuǎn)換為電信號(hào)，然后經(jīng)過電路處理后產(chǎn)生圖像信號(hào)，這樣，就構(gòu)成了一個(gè)３ＣＣＤ系統(tǒng)。
      和單ＣＣＤ相比，由于３ＣＣＤ分別用３個(gè)ＣＣＤ轉(zhuǎn)換紅，綠，藍(lán)信號(hào)，拍攝出來的圖像從彩色還原上要比單ＣＣＤ來的自然，亮度以及清晰度也比單ＣＣＤ好。但由于使用了三片ＣＣＤ，３ＣＣＤ攝像機(jī)的價(jià)格要比單ＣＣＤ貴很多，所以只有**用的攝像機(jī)才會(huì)使用３ＣＣＤ。